在线股票交易平台 人 γ 干扰素(IFN


发布日期:2025-01-13 02:29    点击次数:134


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周一(10月14日)盘前,招商系A股公司齐发增持回购公告在线股票交易平台,招商港口、招商蛇口等5家公司的董事长提议公司回购注销,最高总额合计超过23亿元;招商南油公布了控股股东增持计划。中国外运、辽港股份等央国企也发布了股份回购或增持计划。

一、产品概述

(一)基本信息指标名称:人 γ 干扰素(IFN - γ)酶联免疫试剂盒英文名称:Human Interferon γ(IFN - γ)ELISA KIT规格:96T/48T保质期:6 个月(具体以试剂盒外包装标签为准)用途:用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中人 γ 干扰素(IFN - γ)的浓度。(二)性能指标灵敏度:1.0 pg/mL。特异性:能特异性检测样本中的人 γ 干扰素(IFN - γ),与类似物无明显交叉反应。重复性:板内、板间变异系数均 < 10%。检测范围:25 pg/mL – 800 pg/mL。展开剩余89%二、检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心法。以抗人 γ 干扰素(IFN - γ)抗体包被酶标板,实验时,样品或标准品中的人 γ 干扰素(IFN - γ)会与包被抗体结合,之后加入辣根过氧化物酶标记的抗体,形成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。经过洗板步骤,去除游离成分。再加入显色底物(TMB),在辣根过氧化物酶的催化下,TMB 呈现蓝色,加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样品中人 γ 干扰素(IFN - γ)的浓度呈正相关。最后通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),据此计算样品浓度。

三、实验自备器材酶标仪(450nm)高精度加样器及枪头:0.5 - 10μL、2 - 20μL、20 - 200μL、200 - 1000μL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水四、试剂盒组成

名称96 孔配置48 孔配置备注微孔酶标板12 孔 ×8 条12 孔 ×4 条可拆卸标准品0.3mL×6 管0.3mL×6 管无样本稀释液6mL3mL公共组份检测抗体 - HRP10mL5mL无20× 洗涤缓冲液25mL15mL公共组份底物 A6mL3mL公共组份底物 B6mL3mL公共组份终止液6mL3mL公共组份封板膜2 张2 张可裁剪使用说明书1 份1 份无自封袋1 个1 个临时保存未用完板条

需注意:

标准品浓度从高到低依次为:800、400、200、100、50、25 pg/mL。所有试剂瓶盖需旋紧,以防止蒸发和微生物污染。试剂实际发货体积为准,分装时会略多于标签标明体积,使用时应量取,切勿直接倒出。五、检测前准备提前 60 分钟从冰箱取出试剂盒和样本,使其平衡至室温。若从冰箱取出的浓缩洗涤液有结晶,这属于正常现象。将其放置在室温下,轻轻摇晃均匀,待结晶完全溶解后再配置洗涤液。具体操作是将 20mL 浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成 400mL 工作浓度的洗涤液,未用完的需放回 4℃保存。20× 洗涤缓冲液的稀释比例为蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份 20× 洗涤缓冲液加 19 份蒸馏水。六、样品收集方法血清:全血样品在室温下放置 2 小时或在 4℃过夜后,以 2000prm 转速离心 20 分钟,取上清液即可用于检测。收集血液的试管应为一次性无内毒素试管。血浆:推荐使用 EDTA 钠盐作为抗凝剂。样品采集后 30 分钟内,以 2000prm 转速离心 15 分钟,取上清液进行检测。应避免使用溶血、高血脂的样品。组织匀浆:先用预冷的 PBS (0.01M,pH = 7.4) 冲洗组织,去除残留血液,称重后将组织剪碎。把剪碎的组织与对应体积的 PBS(一般按 1 : 9 的重量体积比,可根据实验需要适当调整并做好记录,推荐在 PBS 中加入蛋白酶抑制剂)一同加入玻璃匀浆器中,在冰上充分研磨。为进一步裂解组织细胞,可对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。最后将匀浆液以 5000prm 转速离心 5 - 10 分钟,取上清液进行检测。细胞提取液:贴壁细胞用冷的 PBS 轻轻清洗,然后用胰蛋白酶消化,以 2000prm 转速离心 5 分钟后收集细胞;悬浮细胞可直接离心收集。收集的细胞用冷的 PBS 洗涤 3 次。每 1×10⁶ 个细胞中加入 150 - 200 μL PBS 重悬,反复冻融使细胞破碎(若含量很低可减少 PBS 体积)。将提取液以 2000prm 转速离心 10 分钟,取上清液检测。细胞培养上清或其他生物体液:以 2000prm 转速离心 20 分钟,除去杂质及细胞碎片,取上清液检测。七、样品注意事项样品收集后若在 1 周内进行检测,可保存于 4℃;若不能及时检测,需按一次使用量分装,冻存于 - 20℃以下,避免反复冻融。溶血标本会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。试剂盒的检测范围与样本的浓度范围不同。若样品中检测物浓度高于标准品最高值,需根据实际情况进行适当倍数稀释(建议先做预实验确定稀释倍数)。使用化学裂解液制备组织匀浆或细胞提取液时,由于引入某些化学物质,可能会导致 ELISA 测值出现偏差。某些重组蛋白可能与试剂盒中捕获或检测抗体不匹配,从而出现不能检测的情况。八、操作步骤计算并确定一次实验所需的预包被板条数,取出所需板条放置在 96 孔框架内,剩余微孔板放回铝箔袋密封,保存于 4ºC。将试剂盒和样本在室温(25 - 28ºC)下平衡 60min,确保充分平衡。设置标准品孔、样本孔和空白孔。标准品孔各加不同浓度的标准品 50 μL。样本孔中加入待测样本 50 μL(可根据情况适当稀释)。空白孔加入样本稀释液 50 μL。所有孔中,每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100 μL,用封板膜封住反应孔,置于 37℃水浴锅或恒温箱温育 45min。弃去液体,在吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置 20s,甩去洗涤液,在吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。每孔加入底物 A、B 各 50 μL,37℃避光孵育 15min。每孔加入终止液 50 μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。九、实验结果计算

各标准品及样本若设复孔,应取其平均值计算。以标准品的浓度为纵坐标,O.D. 值为横坐标,绘出标准曲线(最佳方程式依据回归方程计算的 R² 值确定,R² 值越趋近于 1 越好)。通过样品的吸光度值和标准曲线(直线拟合或者 4 参数拟合)计算出样品的相应浓度(可向工作人员索取计算软件)。若样品有稀释,则将计算结果乘以相应稀释倍数,即为样品实际浓度。

十、典型数据

以下数据仅供参考,实验者需依据自身实验建立标准曲线。

浓度 (pg/mL)2550100200400800OD0.09940.20290.34050.67711.17992.4881

十一、精密度板内精密度:低、中、高浓度样本分别在 1 块板子上检测 20 次。板间精密度:低、中、高浓度样本分别在 3 块板子上检测 20 次。十二、回收率

分别往不同样本中添加已知浓度的 IFN - γ 进行回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

样本类型回收率范围 (%)平均回收率 (%)血清 (n = 5)89 - 10397血浆 (EDTA)(n = 5)87 - 10999细胞培养基 (n = 5)81 - 10595

十三、线性

将添加有 IFN - γ 的样本分别稀释 2 倍、4 倍、8 倍、16 倍进行回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

稀释倍数血清 (n = 5)血浆 (EDTA)(n = 5)细胞培养基 (n = 5)1:2回收率范围 (%):92 - 106,平均回收率 (%):97回收率范围 (%):89 - 103,平均回收率 (%):97回收率范围 (%):90 - 110,平均回收率 (%):991:4回收率范围 (%):84 - 104,平均回收率 (%):97回收率范围 (%):95 - 111,平均回收率 (%):100回收率范围 (%):88 - 100,平均回收率 (%):951:8回收率范围 (%):88 - 104,平均回收率 (%):96回收率范围 (%):94 - 106,平均回收率 (%):100回收率范围 (%):87 - 109,平均回收率 (%):1001:16回收率范围 (%):86 - 106,平均回收率 (%):98回收率范围 (%):95 - 111,平均回收率 (%):100回收率范围 (%):84 - 108,平均回收率 (%):97

十四、警告与友情提醒本试剂盒中使用的终止液为稀硫酸,具有轻微腐蚀性,使用时应避免接触衣物、眼、手等皮肤暴露部位。试剂盒使用完毕后,请妥善处理相关耗材,避免环境污染。十五、说明受现有条件及科学技术水平限制,无法对所有原料进行全面鉴定分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。本试剂盒在研发过程中虽已去除或降低了生物学样本中的一些内源性干扰因素,但并非所有可能影响的因素均已去除。最终实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境等因素密切相关。本公司仅对试剂盒本身负责,不对因使用试剂盒所造成的样本消耗负责,使用者应提前考虑样本使用量,预留充足样本。为保证实验结果,请勿混用其他制造商的产品,严格按照说明书操作。在储存及温育过程中,避免将试剂暴露在强光下。所有试剂瓶盖须盖紧,防止蒸发和微生物污染,以免蛋白水解酶干扰导致测值不准确。刚开启的酶联板板孔中可能会有少许水样物质,这属于正常现象,不会对实验结果造成任何影响。酶标板在使用时从包装袋里取出,请勿提前取出。操作过程中试剂制备或酶标仪参数设置不正确,可能导致结果异常,实验前请仔细阅读说明书并调整好仪器。即使是相同人员操作,也可能在两次独立实验中得到不同的结果,为保证结果的重现性,需要控制实验过程中每一步的操作。试剂盒发货前虽经过严格质检,但运输条件、实验设备差异等因素可能导致用户检测结果与出厂数据不一致,不同批次间试剂盒间的差异也可能源于上述原因。本试剂盒未与其他厂家同类试剂盒或不同方法检测同一目的物的产品进行对比,因此不排除检测结果不一致的情况。本试剂盒仅供研究使用,若将其用于临床诊断或任何其他用途,本公司将不对因此产生的问题负责,亦不承担任何法律责任。

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发布于:湖北省